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水產(chǎn)品中喹乙醇檢測的固相萃取方法
（PolyClean X- HLB）
一、實驗目的
本研究利用固相萃取作為樣品前處理方法，HPLC作為分析方法，檢測水產(chǎn)品樣品中的喹乙醇的殘留水平。該方法操作簡便，可簡化樣品前處理過程，減少有機溶劑的使用。
二、實驗目標物
喹乙醇(CAS:23696-28-8)
三、應用范圍
本方法適用于水產(chǎn)品中喹乙醇的檢測的HPLC檢測及確證。
四、參考標準
《GB/T 8381.7-2009飼料中喹乙醇的測定 高效液相色譜法》
五、實驗材料
NuAnalytical PolyClean X-HLB固相萃取柱60mg/3mL。六、實驗方法
1、 樣品待測溶液制備
準確稱取5 g勻漿魚肉試樣(精確到0.001 g)于50 mL具塞塑料離心管中，加入35 mL甲醇-水溶液(5:95,v/v)，離心管置入搖床中，室溫下恒溫振蕩器振蕩速度110 r/min，避光振蕩45min。提取液在3500 r/min下離心10min，上清液經(jīng)濾紙過濾，濾液加入10 mL正己烷，充分混勻后，以5000 r/min離心10 min，棄取上層溶液，下層溶液待凈化。
2、活化
依次用3 mL甲醇和3 mL水活化。
3、上樣和洗脫
將待凈化液的樣品清液加入已活化好的固相萃取柱中，以1 mL/min的流速過柱，棄去濾液。依次用3 mL 0.02 mol/L鹽酸溶液、0.1 mol/L鹽酸溶液、甲醇-水溶液(5:95, v/v)淋洗固相萃取柱，棄去淋洗液，用吸耳球吹出小柱中殘留液。用5 mL甲醇洗脫固相萃取柱，收集洗脫液。
4、重新溶解
洗脫液于40 ℃氮氣吹干，用2 mL甲醇定容，0.22 μm微孔濾膜過濾，供HPLC測定。
5、HPLC條件
色譜柱：SuperLu C18 (250×4.6mm，5μm)
檢測器：UV@380 nm
流動相：A：甲醇 B：0.1mol/L甲酸水溶液
柱溫：室溫
流速：1.0mL/min
進樣量：20μL
洗脫方式：梯度洗脫，梯度條件如下：
|
時間/min |
A/% |
B/% |
|
0 |
15 |
85 |
|
3 |
15 |
85 |
|
7 |
70 |
30 |
|
12 |
70 |
30 |
|
16 |
15 |
85 |
|
20 |
15 |
85 |
七、實驗結果
1、魚肉基質中喹乙醇的2mg/kg添加回收結果
|
名稱 |
回收率（%） |
平均回收率（%） |
RSD（%） |
||
|
1 |
2 |
3 |
|||
|
喹乙醇 |
90.3 |
88.7 |
85.5 |
88.1 |
2.77 |
2、添加水平為2mg/kg魚肉基質中喹乙醇檢測色譜圖
圖1 添加水平為2mg/kg魚肉基質中喹乙醇檢測色譜圖
